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α-淀粉酶(枯草桿菌)使用的一些常用技術(shù)分析

更新時間:2017-08-21      點(diǎn)擊次數(shù):2041
     α-淀粉酶(枯草桿菌)合適的底物分子是酚類,以及芳香性和脂肪性的胺類。它們催化的過程是底物的單電子氧化,生成相應(yīng)的活性自由基。酶分子中含有4個銅原子構(gòu)成的簇作為催化核心,實(shí)施氧化還原過程。在催化核心中銅原子的相互作用引起了強(qiáng)烈的電子吸收,產(chǎn)生了典型的藍(lán)色。為α-淀粉酶(枯草桿菌)催化的循環(huán)過程,1分子的氧被還原為2分子的水同時4個底物分子氧化產(chǎn)生4個自由基,這些活性的中間物隨后轉(zhuǎn)變?yōu)槎垠w、寡聚體和高聚物。
    除了漆酶80498-15-3在工業(yè)中巨大的應(yīng)用前景外,目前也被用有機(jī)合成中。其中一個很重要的方面是闡明漆酶的作用機(jī)制和開發(fā)新的中介分子。
    因?yàn)?alpha;-淀粉酶(枯草桿菌)已超過地應(yīng)用木質(zhì)素的去除,漆酶的應(yīng)用從原先是針對酚類拓展到其它的非酚類的取代基,例如圖4b中羥基變?yōu)橥F崦负涂梢詫⒐烟侵械奶腔鵆6的羥基氧化為羧基。在這些有機(jī)合成中,漆酶的催化機(jī)制可分為3種類型:一是由化合物催化的電子轉(zhuǎn)移;二是由化合物催化的自由基轉(zhuǎn)移反應(yīng);三是圖化合物催化的離子氧化反應(yīng)。一般在水中的Cu+2/Cu+的離子氧化還原電位僅0.15   V,而漆酶催化的離子氧化反應(yīng),相應(yīng)的電位增大為0.6~0.8V。
    α-淀粉酶(枯草桿菌)催化的*反應(yīng)條件;
    α-淀粉酶(枯草桿菌)的底物多數(shù)是溶解度很差的分子,因此,在選擇反應(yīng)條件時,經(jīng)常需要使用有機(jī)溶劑或?qū)⑵崦腹潭ɑ?/div>
    在催化雌二醇氧化反應(yīng)中,選用的兩相的體系,水-乙酸乙酯。就這樣的體系而言,優(yōu)點(diǎn)是酶在水中比較穩(wěn)定不易失活,缺點(diǎn)是兩相反應(yīng),需經(jīng)過底物的分配,速度慢。如果選用和水能混合的有機(jī)溶劑,成為均相反應(yīng),zui大的問題是酶的穩(wěn)定性差,酶活性降低。利用去垢劑構(gòu)出的反相微團(tuán),可能維持酶的活性。
    α-淀粉酶(枯草桿菌)將酶固定化是目前常用的穩(wěn)定酶的一種方法,可以在有機(jī)溶劑中仍不使酶失活。有趣的是,在使用固定化酶時曾發(fā)現(xiàn),有機(jī)溶劑四氫-2-萘醇可影響產(chǎn)物的比例,這似乎提示了有機(jī)溶劑影響了酶的特異性。
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